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Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒 分子生物試劑

  • 更新時間:  2023-07-27
  • 產品型號:  26157
  • 簡單描述
  • Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒
    Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過免疫沉淀(染色質 IP)高效分離染色質結合 DNA 的便利方法,用于隨后通過 PCR 進行定量分析。
詳細介紹

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒


Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過免疫沉淀(染色質 IP)高效分離染色質結合 DNA 的便利方法,用于隨后通過 PCR 進行定量分析。

磁性 ChIP 試劑盒的特點:

快速— 可在約 8 小時內獲得適于進行定量 PCR 的純化 DNA
高效且可重現(xiàn)—微球菌核酸酶酶切過程和細胞核裂解過程均經高度優(yōu)化
靈敏—只需 10,000 個細胞 (1 x 10^4) 即可獲得結果
低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的試劑中進行封閉,可極大限度地降低背景
全面—包括優(yōu)化的陽性對照試劑:RNA 聚合酶 II 抗體和 GAPDH 啟動子 PCR 引物

Pierce 磁性染色質免疫沉淀分析 (ChIP) 試劑盒含有足夠的試劑,可使用優(yōu)化的方案采用適當對照品進行 30 次 ChIP 檢測。試劑盒中包含的試劑可用于裂解細胞、捕獲蛋白-DNA 復合物,逆轉交聯(lián)以及分離 DNA。封閉 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的結合容量和較低的非特異性背景,可與很多種抗體一起使用。這些微珠可與磁力架或自動化平臺(例如,Thermo Scientific KingFisher 儀器)一起用于手動工作流程。還提供經驗證適用于 ChIP 且具備質量保證的抗體,與 Pierce 磁性 ChIP 試劑盒配合使用。

包括:
試劑盒含有用于染色質制備、IP 以及 DNA 純化的試劑,同時也包含陽性對照品(抗體和引物)

需要:
體內交聯(lián)劑(如甲醛)、微量吸頭超聲波儀(如 Misonix™ 超聲波儀 3000)、符合 ChIP 要求的首xuan抗體、目標 DNA 序列的 PCR 引物、PCR 預混液(如果需要 qPCR,則含有一種染料,如 SYBR™ Green)和 qPCR 儀器

應用:
• 通過 PCR 或 ChIP-Seq 確定基因組 DNA 上特異性蛋白-DNA 相互作用的位點
• 監(jiān)測組蛋白修飾或化學制劑對 DNA 結合的影響

要想成功進行 ChIP 檢測,需要在檢測靶標基因組 DNA 之前執(zhí)行多個關鍵步驟(交聯(lián)、染色質制備、免疫沉淀)。單獨來講,ChIP 實驗方案中的每一步在優(yōu)化時都很費時間。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒簡化了 ChIP 流程,可獲得準確且可重現(xiàn)的結果。

蛋白-DNA 復合物首先在體內與甲醛交聯(lián)。試劑盒含有的試劑可以裂解細胞,并可提取和溶解交聯(lián)復合物。然后,將復合物和特異性抗體放在一起進行孵育,最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠進行分離。在逆轉交聯(lián)和酶切蛋白后,純化所得 DNA 片段,然后準備進行標準或定量 PCR。



Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒


規(guī)格

容量(公制)
4×10^6 個細胞/反應
描述
Pierce 磁性 ChIP 試劑盒
形式
試劑盒
產品線
Pierce™
數(shù)量
1 個試劑盒
類型
磁珠 ChIP 試劑盒
足夠用于
30 次反應
產品規(guī)格
試劑盒

內容與儲存

• 甘an酸溶液 (10X),15 mL;在室溫下儲存
• PBS (20X),15 mL;在 4°C 下儲存
• Halt™ 蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物,無 EDTA (100X),1 mL;在 4°C 下儲存
• 膜提取緩沖液,10 mL;在 4°C 下儲存
• MNase 酶切緩沖液,10 mL;在 4°C 下儲存
• DTT (7.7 mg),凍干,2 個樣品瓶;在室溫或 4°C 下儲存
• MNase 終止液,1 mL;在 4°C 下儲存
• ChIP 級蛋白 A/G 磁珠,0.7 mL;在 4°C 下儲存
• IP 稀釋/洗滌緩沖液 (5X),40 mL,在 4°C 下儲存
• 氯化鈉 (5M),6 mL;在 4°C 下儲存
• IP 洗脫緩沖液 (2X),4.5 mL;在 4°C 下儲存
• 微量離心管,1.5 mL,75 個管;在室溫或 4°C 下儲存
• DNA 純化柱和試劑,40 次純化;在室溫或 4°C 下儲存
• DNA 純化柱,40 個柱
• DNA 柱結合溶液,30 mL
• DNA 柱洗滌液,6 mL
• pH 指示劑,0.8 mL
• DNA 柱洗脫液,5 mL
• 微球菌核酸酶(ChIP 級)(10 U/µL),50 µL;在-20°C 下儲存
• 抗 RNA 聚合酶 II 抗體,25 µL;在-20°C 下儲存
• 正常兔 IgG (1 mg/mL),10 µL;在-20°C 下儲存
• 蛋白酶 K (20 mg/mL),0.25 mL;在-20°C 下儲存
• ChIP 陽性對照引物(GAPDH 啟動子,人特異性),100 µL;在 -20°C 下儲存




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